C Anaphylatoxin C 過敏毒素

上海起發(fā)為complementtech一級(jí)經(jīng)銷商，Complement Technology，Inc.于2005年成立.CompTech于2005年收購Advanced Research Technologies。Complement Technology繼續(xù)為世界各地的科學(xué)家提供高質(zhì)量的試劑，并在我們的清單中增加了許多新試劑。我們盡力為您的應(yīng)用提供宜試劑和使用我們補(bǔ)充試劑的宜建議。 

名稱： C 過敏毒素  （不是重組的）

C Anaphylatoxin  (Not Recombinant)

目錄號(hào)：      A144    和A144（ 300）    

可用尺寸：          30微克    和      300微克

濃度：           0.5 mg / mL （見實(shí)際濃度分析證書）

滅絕 科夫。        阿 _280 納米=  0.41以1.0毫克/毫升

分子量：      10,400Da（單鏈）

形式：                          冷凍液體

活性：髓過氧化物酶釋放測定 > 70％

純度：                         SDS-PAGE> 97％

緩沖液：                        20mM HEPES，100mM NaCl，pH 7.2（不加載體蛋白質(zhì)）

防腐劑               無

內(nèi)毒素：                  通常<0.1 EU /μg

存儲(chǔ)：                      -70 ^Ò C或以下。  避免凍結(jié)/解凍。

資源：                       正常 人血清（通過認(rèn)證測試顯示為陰性

                                    對(duì)于 HBsAg，HTLV-I / II，STS以及針對(duì)HCV，HIV-1的抗體

                                    和 HIV-II）。

預(yù)防措施：               使用正常的預(yù)防措施處理人體血液制品。

產(chǎn)地：                        制造在美國。

一般描述

            通過人C5轉(zhuǎn)化酶切割C和C5b之間的肽鍵從人C5蛋白制備天然人C。  C是一種天然糖基化的多肽，含有74個(gè)氨基酸，分子量約為。10,400道爾頓。  它含有25％碳水化合物，與位置64處的單個(gè)Asn殘基連接。   該碳水化合物具有不同的結(jié)構(gòu)，通過質(zhì)譜分析分析MW導(dǎo)致MW的廣泛分布。  C是有效的無乙酰半乳糖毒素（與C3a和C4a相比）。  其生物學(xué)特性包括對(duì)嗜中性粒細(xì)胞具有強(qiáng)烈的趨化性（PMN），引起平滑肌收縮，增加血管通透性，引起組胺和TNF-α釋放，并引起 免疫細(xì)胞的溶酶體 脫顆粒。  C通過PMN，單核細(xì)胞，肺泡巨噬細(xì)胞和肥大細(xì)胞上的C受體（CR，CD88，G蛋白偶聯(lián)受體）起作用。  未知功能的第二個(gè)受體（C5L2，gpr77）已被確定。  由于廣泛表達(dá)的  C的受體和CR的KO小鼠的結(jié)果人們認(rèn)為C和其受體有很多非immunolgical 功能器官發(fā)育，中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育，神經(jīng)退行性疾病，組織再生和造血 （Monk，PN等（2007））。

天然與重組C

            許多公司銷售了許多重組形式的C。  在并行生物測試中，我們發(fā)現(xiàn)，我們的原生C比每種微生物活性高10至100倍，而不是其中一種重組蛋白。  結(jié)構(gòu)上，市場上沒有一種重組蛋白具有正確的氨基酸序列或結(jié)構(gòu)。  它們?cè)贜-末端具有額外的氨基酸（例如6個(gè)His標(biāo)簽），在序列本身中有不同的氨基酸（一些由初的但不正確的氨基酸序列產(chǎn)生），并且在Asn 64中沒有一個(gè)具有25％的碳水化合物。  事實(shí)上，一種重組C的市場上在N-末端約30個(gè)額外的氨基酸，由于所用的克隆載體中。  這是C分子無意義結(jié)構(gòu)的40％加入。我們的C和CdesArg都是由天然人C5轉(zhuǎn)化酶產(chǎn)生的天然蛋白質(zhì)。 

物理特性和結(jié)構(gòu)

            分子量：  10,400（由于可變糖基化造成+ 1,000 ）

Deglycosylated MW：   8,271（觀察）。計(jì)算單同位素質(zhì)量8268;

計(jì)算的平均質(zhì)量8273。

            等電點(diǎn)：pI = 8.9    

碳水化合物含量：?25   ％碳水化合物（異質(zhì)）

            氨基酸序列：TLQKKIEEIA AKYKHSVVKK CCYDGACVNN    

DETCEQRAAR ISLGPRCIKA FTECCVVASQ LRANISHKDM QLGR

            CAS號(hào)：  80295-54-1

MDL編號(hào)：  MFCD00130842       

NMR衍生 結(jié)構(gòu)：FEBS Lett。238：289-294,1988; 生物化學(xué)28：172-185，

            1989; 生物化學(xué)29：2895-2905,1990; 蛋白質(zhì)28：261-267,1997。

功能

            由C5轉(zhuǎn)化酶從C5釋放的C引發(fā)許多炎癥反應(yīng)。  C引起嗜中性粒細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞粘附并通過趨化性遷移到補(bǔ)體活化部位， 刺激PMN顆粒內(nèi)容物和活性氧的釋放。  C的生物學(xué)特性包括對(duì)嗜中性粒細(xì)胞 （PMN）有強(qiáng)烈的趨化性，引起平滑肌收縮，增加血管通透性，引起組胺釋放，并引發(fā)各種免疫細(xì)胞的溶酶體 脫粒。  C通過PMN上的C受體（CR，G蛋白偶聯(lián)受體），單核細(xì)胞，肺泡巨噬細(xì)胞，樹突細(xì)胞，肥大細(xì)胞，神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞。  C和其他過敏毒素的快速釋放可引起全身作用以及局部變化。過敏性休克是一種廣泛的循環(huán)性癱瘓，類似于由過敏反應(yīng)引起的循環(huán)性癱瘓，并且由通常一起釋放的C3a和C引起。   

測定

            C的多種生物功能導(dǎo)致使用許多不同的測定系統(tǒng)（Dodds，AW和Sim，RB（1997））。  典型的生物測定是使用豚鼠回腸的平滑肌收縮測定，使用嗜中性粒細(xì)胞的趨化性測定或使用人類PMN或類似細(xì)胞系的顆粒釋放測定。通常在顆粒釋放后通過測量髓過氧化物酶的釋放。此外，已經(jīng)描述了測定來自豚鼠血小板的ATP釋放，來自豚鼠血小板的血清素再釋放酶 ，N-乙酰-β-D- 葡糖胺酶    從分化的U937細(xì)胞釋放和從分化的U937細(xì)胞釋放鈣。  已經(jīng)詳細(xì)描述了這些測定（Dodds，AW和Sim，RB（1997））。   已經(jīng)在 純化的人C的亞皮摩爾濃度范圍內(nèi)檢測到功能性反應(yīng)（Gerard，C。等（1981）; Hugli，TE等（1981））。

            許多公司銷售用于測定血液和其他流體中的C水平（或更正確的C去飽和水平）的ELISA試劑盒。  C / C desArg的放射免疫分析也可用。  這些測量對(duì)于檢測體內(nèi)補(bǔ)體激活是有用的，但是由于過敏毒素的清除速度很快，其含義的解釋變得復(fù)雜。 

體內(nèi)

            已報(bào)道靜息血清濃度約為4nM， 盡管在沒有1至10％C5活化的情況下難以抽取或儲(chǔ)存血液（Watkins，J。（1987））。收集管  中EDTA和Futhan的存在可以大限度地減少這種背景。  在血液所有C5的*活化（75微克/ 毫升）將導(dǎo)致?380 納米的C（?3.9微克/ 毫升）。  由于許多C響應(yīng)的敏感性，理論上可以通過激活局部區(qū)域中C5的大約百萬分之一來啟動(dòng)響應(yīng)。

規(guī)

            C水平由三個(gè)過程調(diào)控：形成，失活和清除。切割C5并釋放C的酶（統(tǒng)稱為C5轉(zhuǎn)化酶）以非常低的速率進(jìn)行。  在Vmax運(yùn)行時(shí)，的酶只能每三分鐘切掉一個(gè)C5（Rawal，N.和Pangburn，MK（2001））。  C通過去除其C-末端精氨酸氨基酸而“失活” 。通過血漿酶羧肽酶N（Mueller-Ortiz SL et al。（2009））的作用產(chǎn)生  產(chǎn)物C desArg（或不含C端精氨酸的 C ）。  這種滅活很快，大部分C在其形成幾分鐘內(nèi)轉(zhuǎn)化為C desArg。“鈍化”C仍然擁有約。其1％過敏性和趨化性活性，但其刺激活性僅降低10倍。  因此，C desArg即使經(jīng)常被稱為失活的C也能保留相當(dāng)?shù)纳锘钚浴?nbsp; 由于大量帶有C受體的細(xì)胞（內(nèi)皮細(xì)胞，免疫細(xì)胞，平滑肌細(xì)胞，神經(jīng)細(xì)胞等），C的捕獲，內(nèi)化和消化導(dǎo)致其從循環(huán)中快速移除。

不足之處

            C5缺陷或C5裂解酶產(chǎn)生C  的酶缺乏導(dǎo)致不存在C。  沒有已知的C5轉(zhuǎn)化酶*缺陷。  存在C5缺陷人和小鼠的實(shí)例。  事實(shí)上，許多常用的實(shí)驗(yàn)室小鼠品系表現(xiàn)出C5缺陷（A / HeJ，AKR / J，DBA / 2J，NZB / B1NJ，SWR / J和B10.D2 / nSnJ）。  C5的缺乏防止了補(bǔ)體的膜攻擊復(fù)合物的形成并且阻止了C的形成。  缺乏C5的人容易受到來自多種生物體（主要為革蘭氏陰性細(xì)菌）的反復(fù)感染的影響。  腦膜炎球菌和淋球菌 奈瑟球菌感染尤其成問題。與C5缺陷有關(guān)的病理學(xué)程度是由于C5缺乏或C缺失造成的，目前尚不清楚，但有關(guān)這方面的信息是從受體敲除動(dòng)物獲得的。

疾病

            見上面的缺陷。

注意事項(xiàng)/毒性/危險(xiǎn)

            這種蛋白質(zhì)是從人血清中純化出來的，因此必須使用適合于處理任何血液衍生產(chǎn)品的預(yù)防措施，即使來源通過認(rèn)證測試顯示HBsAg，HTLV-I / II，STS陰性和抗HCV抗體， HIV-1和HIV-II。

            注射會(huì)引起過敏性休克，這是一種類似于由過敏反應(yīng)引起的廣泛循環(huán)衰竭。

            危險(xiǎn)代碼：B            WGK德國 3

            MSDS可根據(jù)要求提供。

參考

Carney，F(xiàn)F和Hugli，TE（1993）人C的N端區(qū)域中影響C與嗜中性粒細(xì)胞 C受體相互作用的位點(diǎn)特異性突變。 蛋白質(zhì)科學(xué)。2，1391-1399。

Delgado- Cervino，E.，F(xiàn)ontan，G。和Lopez-Trascasa，M。（2005）西班牙家族的C5補(bǔ)體缺乏癥。負(fù)責(zé)缺陷的雙重突變的分子表征。摩爾。免疫學(xué)。42，105-111

Dodds，AW和Sim，RB編輯（1997年）補(bǔ)充。實(shí)用方法（ISBN 019963539）牛津 大學(xué) 按， 牛津。

Gerard ，C.， Chenoweth，DE。和Hugli，TE。（1981）人嗜中性粒細(xì)胞對(duì)C的響應(yīng)：人C desArg-74的寡糖部分而不是C在生物活性中的作用。J. Immunol。127，1978-1982。

Hugli，TE，Gerard，C.，Kawahara，M.， Scheetz， 我第二，Barton，R.，Briggs，S.，Koppel，G。和Russell，S。從補(bǔ)體激活的人血清中分離三種單獨(dú)的過敏毒素。 （1981）Mol。細(xì)胞。 Biochem。 41，59-66。

Monk，PN，Scola，AM，Madala，P.，和Fairlie，DP（2007）補(bǔ)體C受體的功能，結(jié)構(gòu)和治療潛力。BR。J. Pharmacol。152，429-448。

Mealler -Ortiz，SL，Wang，D。，Morales JE，L??i，L.，Chang，JY。和Wetsel，RA（2009）Targeted disruption of the gene encoding the murine small subunit of carboxypeptidase N（CPN1） C 過敏毒素介導(dǎo)的休克。（2009）J.Immunol。182：6533-6539。

Rawal，N。和Pangburn，MK（2001）形成補(bǔ)體旁路途徑的高親和力C5轉(zhuǎn)化酶。  J. Immunol。166：2635-2642。

羅斯，SC 和Densen，P。（1984）補(bǔ)充缺陷狀態(tài)和感染：流行病學(xué)，發(fā)病機(jī)理以及 免疫缺陷中奈瑟氏球菌和其他感染的后果。醫(yī)學(xué)63,243-273。

Watkins，J.（1987）調(diào)查對(duì)麻醉 劑的過敏和過敏反應(yīng)。BR。J. Anaesth。59，104-111

Zuiderweg，ERP，Mollison，KW，Henkin，J。和Carter，GW（1988）人類炎性蛋白質(zhì)C 的1 H NMR 譜中的序列特異性分配。生物化學(xué)27,3568-3580。

僅供研究使用。

不適用于人類或藥物使用。

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