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    haemtech HCAPC-0080說明書

     更新時間:2018-11-09 點(diǎn)擊量:1436

    Haematologic Technologies,Inc。(HTI/haemtech)是一家ISO 9001:2015注冊公司,是一家專業(yè)從事體外研究用高質(zhì)量血漿蛋白分離和表征的主要制造商。HTI的重點(diǎn)是凝血級聯(lián)中涉及的蛋白質(zhì),以及骨代謝的調(diào)節(jié)。HTI產(chǎn)品系列包括超過150種高度純化和充分表征的蛋白質(zhì),包括酶原,酶,輔因子和抑制劑,以及單克隆和多克隆抗體的互補(bǔ)系列。還可提供因子缺乏的等離子體和定制的血液采集管,用于臨床研究。提供的服務(wù)包括定制蛋白質(zhì)純化,蛋白質(zhì)修飾,化驗開發(fā),合同制造和合同研究。

     

    haemtech Haematologic Technologies,Inc。(HTI/haemtech)是一家ISO 9001:2015注冊公司,是一家專業(yè)從事體外研究用高質(zhì)量血漿蛋白分離和表征的主要制造商。HTI的重點(diǎn)是凝血級聯(lián)中涉及的蛋白質(zhì),以及骨代謝的調(diào)節(jié)。HTI產(chǎn)品系列包括超過150種高度純化和充分表征的蛋白質(zhì),包括酶原,酶,輔因子和抑制劑,以及單克隆和多克隆抗體的互補(bǔ)系列。還可提供因子缺乏的等離子體和定制的血液采集管,用于臨床研究。提供的服務(wù)包括定制蛋白質(zhì)純化,蛋白質(zhì)修飾,化驗開發(fā),合同制造和合同研究。

     

    haemtech HCAPC-0080說明書

    Activated Protein C

    活化蛋白C.

     

    活化蛋白C(APC)對因子Va的失活
    表示APC對因子Va的蛋白水解失活,其中:PS =蛋白質(zhì)S,PCPS =磷脂囊泡(或細(xì)胞表面)和Ca ++ =鈣離子。因子Va對形成因子Vai的失活是由APC(實(shí)心箭頭)在三個特定位點(diǎn)處的因子Va重鏈(94K)的蛋白水解產(chǎn)生的(1,2)。因子Va重鏈中這些切割位點(diǎn)的位置如下:(人:R306,R506和R679)和(牛:R306,R505和R662)。輔因子分子的*失活需要在精氨酸-306位置切割。通過活化蛋白C在精氨酸-306處的切割僅在膜的存在下發(fā)生,并且需要在精氨酸-505處預(yù)先切割重鏈。APC對因子Va輕鏈的蛋白水解僅發(fā)生在牛分子中,并且不需要滅活(虛線箭頭)。

    活化蛋白C(APC)是一種抗凝血絲氨酸蛋白酶,來自兩條鏈,維生素K依賴性酶原,蛋白C(3-7)。α-凝血酶和血栓調(diào)節(jié)蛋白之間的復(fù)合物在蛋白C的重鏈中催化Arg-12(牛中的Arg-14)的單一切割,以產(chǎn)生活化的蛋白C.幾種非生理學(xué)相關(guān)的蛋白酶,例如RVV-X活化劑,胰蛋白酶和PROTAC也能夠激活蛋白C.

    APC起到抗凝血劑的作用,其催化輔因子Va和VIIIa的蛋白水解失活,導(dǎo)致凝血酶原酶和因子Xase復(fù)合物的抑制。因子Va和VIIIa的失活是Ca 2+和磷脂依賴性的。維生素K依賴性輔因子蛋白S通過與APC形成1:1復(fù)合物(Kd = 6×10-9M)適度地增加該失活速率(8)。

    有幾個因素會削弱APC的抗凝血活性。因子Xa通過競爭因子Va上的類似結(jié)合位點(diǎn)來保護(hù)因子Va免受APC的蛋白水解。凝血酶也被提議作為APC的調(diào)節(jié)劑通過蛋白質(zhì)S的蛋白水解失活。此外,APC受循環(huán)肝素依賴性蛋白質(zhì)的調(diào)節(jié)。 C抑制劑(PAI-3),循環(huán)肝素非依賴性蛋白C抑制劑,血小板衍生蛋白C抑制劑和PAI-1。據(jù)報道,在APC和兩種類型的PAI之間形成的復(fù)合物是在輸注APC或體內(nèi)產(chǎn)生APC時觀察到的纖維蛋白溶解增加的原因。

    除了我們的標(biāo)準(zhǔn)APC制劑,還可以獲得含有丹磺酰-EGEG-氯代甲基酮的活性位點(diǎn)封閉形式。

     

     

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    HCAPC-0080 人類活性蛋白C

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    尺寸

    50微克

    公式

    50%(體積/體積)甘油/ H 2 O.

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    存儲

    -20℃下

    純度

    通過SDS-PAGE> 95%

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    活動決定

    顯色分析

    保質(zhì)期(妥善保存)

    12個月

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     HCAPC-DEGR 人類活化蛋白C - DEGR(活性位點(diǎn)受阻)

    尺寸

    50微克

    公式

    20mM Tris,150mM NaCl,pH 7.4

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    存儲

    -80℃下

    純度

    通過SDS-PAGE> 95%

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    活動決定

    顯色分析

    保質(zhì)期(妥善保存)

    12個月

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     BCAPC-1080 牛活性蛋白C

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    尺寸

    50微克

    公式

    50%(體積/體積)甘油/ H 2 O.

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    存儲

    -20℃下

    純度

    通過SDS-PAGE> 95%

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    活動決定

    顯色分析

    保質(zhì)期(妥善保存)

    12個月

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     BCAPC-DEGR 牛活性蛋白C - DEGR(活性位點(diǎn)受阻)

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    尺寸

    50微克

    公式

    20mM Hepes,150mM NaCl,pH 7.4

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    存儲

    -80℃下

    純度

    通過SDS-PAGE> 95%

    •  

    活動決定

    顯色分析

    保質(zhì)期(妥善保存)

    12個月

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    通過用凝血酶活化然后通過離子交換層析(4)從純化的蛋白C制備活化的蛋白C. APC以50%(vol / vol)甘油/ H2O供應(yīng),應(yīng)儲存在-20oC。通過SDS-PAGE分析確定純度,并使用顯色底物測定法測量活性。根據(jù)APC耐藥性測定的要求,還測試了所有生產(chǎn)批次的APC延長正常人血漿aPTT的能力(10,11)。每批次提供該測試的結(jié)果,作為aPTT(+/- APC)比率(10nM APC)。

    凝膠

    Novex 4-12%Bis-Tris

    加載

    人aPC,每泳道1μg

    緩沖

    MOPS

    標(biāo)準(zhǔn)

    SeeBluePlus 2; 肌球蛋白(191 kDa),磷酸化酶B(97 kDa),BSA(64 kDa),谷氨酸脫氫酶(51 kDa),酒精脫氫酶(39 kDa),碳酸酐酶(28 kDa),肌紅蛋白紅(19 kDa),溶菌酶(14 kDa的)

     

    本土化

    等離子體

    行動方式

    抗凝血劑,使因子Va和VIIIa失活

    分子量

    56,200(人類)(5)
    52,650(牛)(5)

    消光系數(shù)

    Ë

    1%

    1厘米,280納米

     

    = 14.5(人類)(9)

     

     

    = 13.7(牛)(9)

     

    等電點(diǎn)

    4.4-4.8(人類)(9)
    4.2-4.5(牛)(9)

    結(jié)構(gòu)體

    兩條鏈,Mr = 35,000和21,000,二硫鍵連接,NH2-末端gla結(jié)構(gòu)域兩個EGF結(jié)構(gòu)域

    碳水化合物百分比

    23%(人類)(5)
    14%(牛)(5)

    翻譯后修改

    十一個gla殘留物(牛),九個gla殘基(人),一個β-羥基天冬氨酸

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