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    BioThema 266-311說明書

     更新時間:2018-12-11 點擊量:1148

    BioThema*專注于螢火蟲熒光素酶反應(yīng)的分析應(yīng)用,無論是檢測細(xì)胞,測量酶活性還是其他東西。在該反應(yīng)中,用ATP(三磷酸腺苷)活化熒光素,然后氧化成氧化熒光素和CO 2。氧化熒光素以激發(fā)態(tài)形成,并在進入其基態(tài)時發(fā)光。通常在所謂的發(fā)光計中測量光。

    ATP + 熒光素+ O 2 -熒光素酶 - > AMP +焦磷酸+氧化熒光素+ CO 2 +光

    在ATP的測定中,光發(fā)射可以基本上恒定或快速衰減。因此,基于螢火蟲熒光素酶反應(yīng),存在穩(wěn)定的光和閃光型ATP試劑。在熒光素酶水平低的情況下,每分鐘消耗的ATP比例可以忽略不計,然后光可以幾乎恒定但也很低。在高水平的熒光素酶下,ATP被消耗是不可避免的,導(dǎo)致光迅速減少,但初峰值光很高。實際上,峰高和衰減率都與熒光素酶活性成比例。BioThema開發(fā)了三種ATP試劑

    BioThema 266-311說明書 

    ATP生物質(zhì)試劑盒HS

    ATP Biomass Kit HS

     

    用于測定樣品中ATP的總量(細(xì)胞外和細(xì)胞內(nèi))量。

    ATP生物質(zhì)試劑盒適用于幾乎所有類型的樣品。

    該試劑盒的靈敏度允許在各種情況下測定低ATP水平:
    1液體(如飲用水,工藝用水,環(huán)境樣品,飲料和啤酒)
    2藥品和化妝品
    3細(xì)胞與表面的粘附(例如生物相容性研究)
    4質(zhì)量洗衣保證
    5細(xì)菌生長。
    6對細(xì)菌的抗生素作用

    SKU:266-311

     

     

    應(yīng)用

    該試劑盒用于測定含有活細(xì)胞的樣品中的總ATP(三磷酸腺苷)。如果目的是確定細(xì)胞內(nèi)ATP,則應(yīng)考慮使用266-111細(xì)胞內(nèi)ATP試劑盒HS或266-112微生物ATP試劑盒HS。這些試劑盒包括用于降解細(xì)胞外ATP的ATP消除試劑,后者試劑盒還包括用于裂解大多數(shù)動物細(xì)胞的細(xì)胞裂解試劑。所有活細(xì)胞都含有ATP,它在不同細(xì)胞過程之間起著能量貨幣的作用。當(dāng)細(xì)胞死于自然原因時,ATP通常會降解。在所有類型的細(xì)胞中,小心地將ATP的細(xì)胞內(nèi)濃度調(diào)節(jié)至相似水平。因此,ATP是細(xì)胞內(nèi)總體積的良好估計。大多數(shù)細(xì)菌細(xì)胞含有大約。2×10 -18每個細(xì)胞的摩爾ATP,而大多數(shù)真核細(xì)胞由于其較大的尺寸,含有10-15摩爾ATP或更多。ATP生物質(zhì)試劑盒HS,細(xì)胞內(nèi)ATP試劑盒HS和微生物ATP試劑盒HS含有具有高熒光素酶活性的ATP試劑HS(高靈敏度)。ATP試劑HS中的熒光素酶活性實際上非常高,如果在重構(gòu)過程中受到污染,它將每38分鐘將ATP背景降低一個數(shù)量級。混合樣品和ATP試劑HS后,光強度衰減約。每分鐘6%。這足夠慢以允許手動混合,并且可以使用沒有試劑分配器的管發(fā)光計。試劑的檢出限為10×10 -18使用靈敏的光度計測量ATP。這相當(dāng)于5個細(xì)菌細(xì)胞。我們必須在這里區(qū)分細(xì)菌細(xì)胞和CFU,因為一個CFU可能由幾個細(xì)胞組成。如果檢測限不足,則可以通過微濾濃縮樣品,該過程也將除去大部分細(xì)胞外ATP。

    儀器

    任何管或微孔板發(fā)光計。應(yīng)該注意的是,管發(fā)光計的靈敏度大約一個數(shù)量級。如果使用微孔板發(fā)光計,它應(yīng)該至少有兩個分配器,并且應(yīng)該能夠混合微孔板。

    分析程序

    詳細(xì)描述的程序可在“使用說明”中找到,該說明書隨每個套件一起提供。

    產(chǎn)品特性

    該試劑盒包含用于150-375測定的試劑(每個小瓶ATP試劑HS足以在管發(fā)光計中進行25次測定,在微孔板發(fā)光計中進行62.5次測定)。

    檢測限:

    使用靈敏的發(fā)光計,試劑的檢出限為10×10 -18 mol ATP。這相當(dāng)于5個細(xì)菌細(xì)胞。

    參考

    1 Lundin,A。(2000)在生物量,酶和代謝物的ATP相關(guān)測定中使用螢火蟲熒光素酶。方法Enzymol。305,346-370。

     

    Intracellular ATP Kit HS

    細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)ATP的測定

    該試劑盒的靈敏度允許在各種情況下測定低ATP水平,條件是降解體細(xì)胞中的ATP并不重要:
    1。液體的細(xì)菌控制(例如飲用水,工藝用水,飲料和啤酒)
    2。藥品和化妝品
    3.細(xì)胞與表面的粘合
    4.洗衣的質(zhì)量保證
    5.細(xì)菌生長。
    6.對細(xì)菌的抗生素作用

     

     

    應(yīng)用

    該試劑盒用于測定活細(xì)胞中的細(xì)胞內(nèi)ATP(三磷酸腺苷)。樣品中的細(xì)胞外ATP被酶促降解。如果樣品還含有體細(xì)胞并且目的是確定微生物ATP,我們建議使用266-112微生物ATP試劑盒,包括用于大多數(shù)動物細(xì)胞的細(xì)胞裂解試劑。如果樣品中只有一種類型的細(xì)胞且沒有細(xì)胞外ATP,則可以使用266-311 ATP生物質(zhì)試劑盒。所有活細(xì)胞都含有ATP,它在不同細(xì)胞過程之間起著能量貨幣的作用。當(dāng)細(xì)胞死于自然原因時,ATP通常會降解。在所有類型的細(xì)胞中,小心地將ATP的細(xì)胞內(nèi)濃度調(diào)節(jié)至相似水平。因此,ATP是細(xì)胞內(nèi)總體積的良好估計。大多數(shù)細(xì)菌細(xì)胞含有大約。2×10-18 mol ATP /細(xì)胞,而大多數(shù)真核細(xì)胞由于其較大的尺寸,含有10-15 mol或更多的ATP。ATP生物質(zhì)試劑盒HS,細(xì)胞內(nèi)ATP試劑盒HS和微生物ATP試劑盒HS含有具有高熒光素酶活性的ATP試劑HS(高靈敏度)。ATP試劑HS中的熒光素酶活性實際上非常高,如果在重構(gòu)過程中受到污染,它將每38分鐘將ATP背景降低一個數(shù)量級。混合樣品和ATP試劑HS后,光強度衰減約。每分鐘6%。這足夠慢以允許手動混合,并且可以使用沒有試劑分配器的管發(fā)光計。試劑的檢出限為10×10 -18使用靈敏的光度計測量ATP。這相當(dāng)于5個細(xì)菌細(xì)胞。我們必須在這里區(qū)分細(xì)菌細(xì)胞和CFU,因為一個CFU可能由幾個細(xì)胞組成。如果檢測限不足,則可以通過微濾濃縮樣品,該過程也將除去大部分細(xì)胞外ATP。

    儀器

    可以使用任何管或微孔板發(fā)光計。應(yīng)該注意的是,管發(fā)光計比微孔板發(fā)光計靈敏度大約一個數(shù)量級。如果使用微孔板發(fā)光計,它應(yīng)該至少有兩個分配器,并且應(yīng)該能夠混合微孔板。

    分析程序

    詳細(xì)描述的程序可在“使用說明”中找到,該說明書隨每個套件一起提供。

    產(chǎn)品特性

    該試劑盒包含用于150-375測定的試劑(每個小瓶ATP試劑HS足以在管發(fā)光計中進行25次測定,在微孔板發(fā)光計中進行62.5次測定)。

    檢測限:

    使用靈敏的發(fā)光計1,試劑的檢出限為10×10-18 mol ATP 。

    參考

    1 Lundin,A。(2000)在生物量,酶和代謝物的ATP相關(guān)測定中使用螢火蟲熒光素酶。方法Enzymol。305,346-370。
    2 Lundin,A。(1999)ATP檢測生物污染。在“30th R3-Nordic Contamination Control Symposium”(Eds.G.Wirtanen,S.Salo and A. Mikkola),VTT,Espoo,F(xiàn)inland,pp.337-352。

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