genebridges K006說明書

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Quick & Easy E. coli Gene Deletion Kit

gene bridges快速簡便的大腸桿菌基因刪除試劑盒

細節：

特征

• Red / ET的忠實重組

• 快速

• 可能有多個淘汰賽

• 方便地去除重組質粒

應用

該試劑盒旨在在不到一周的時間內敲除或改變大腸桿菌染色體上的基因。

描述

紅色/ ET重組使堿基對可以，特異性和忠實的方式交換遺傳信息。試劑盒隨附有FRT側翼的卡那霉素抗性標記盒，可用于替換大腸桿菌染色體上的基因。Red / ET重組可替代大腸桿菌染色體上長達30kb的片段。如果需要，使用FRT側翼抗性盒替代目標基因可以隨后通過FLP重組酶步驟去除選擇標記。FLP表達質粒可以從Gene Bridges購買。重復插入試劑盒隨附的功能盒或與Gene Bridges提供的其他功能盒組合可產生多個基因敲除。重組過程由于pRed / ET表達質粒的優化設計而受到嚴格控制。重組蛋白的基因在誘導型啟動子的控制下，質粒帶有溫度敏感的復制起點，可在重組后方便地除去質粒。

內容

• 兩個Red / ET重組蛋白表達質粒pRed / ET（tet）和pRed / ET（amp）。通過用這些質粒轉化，可將任何大腸桿菌菌株制成Red / ET精通的

• FRT位于卡那霉素抗性模板的側面（FRT-PGK-gb2-neo-FRT），可用于您自己的實驗。

• 陽性對照，用于替換大腸桿菌染色體上的甘露糖轉運蛋白（man X）基因。

• 詳細的協議，質粒，圖譜和序列的描述

序列

FRT-PGK-GB2-NEO-FRT

FRT  啟動子neo ^R 終止子   

AATTAACCCTCACTAAAGGGCGGCCGC GAAGTTCCTATTCTCTAGAAAGTATAGG AACTTC ATTCTACCGGGTAGGGGAGGCGCTTTTCCCAAGGCAGTCTGGAGCATGC GCTTTAGCAGCCCCGCTGGGCACTTGGCGCTACACAAGTGGCCTCTGGCCTCGCA CACATTCCACATCCACCGGTAGGCGCCAACCGGCTCCGTTCTTTGGTGGCCCCTT CGCGCCACCTTCCACTCCTCCCCTAGTCAGGAAGTTCCCCCCCGCCCCGCAGCTC GCGTCGTGCAGGACGTGACAAATGGAAGTAGCACGTCTCACTAGTCTCGTGCAGA TGGACAGCACCGCTGAGCAATGGAAGCGGGTAGGCCTTTGGGGCAGCGGCCAATA GCAGCTTTGCTCCTTCGCTTTCTGGGCTCAGAGGCTGGGAAGGGGTGGGTCCGGG GGCGGGCTCAGGGGCGGGCTCAGGGGCGGGGCGGGCGCCCGAAGGTCCTCCGGAG GCCCGGCATTCTGCACGCTTCAAAAGCGCACGTCTGCCGCGCTGTTCTCCTCTTC CTCATCTCCGGGCCTTTCGACCTGCAGCAGCACGTGTTGACAATTAATCATCGGC ATAGTATATCGGCATAGTATAATACGACAAGGTGAGGAACTAAACCATGGGATCG GCCATTGAACAAGATGGATTGCACGCAGGTTCTCCGGCCGCTTGGGTGGAGAGGC TATTCGGCTATGACTGGGCACAACAGACGATCGGCTGCTCTGATGCCGCCGTGTT CCGGCTGTCAGCGCAGGGGCGCCCGGTTCTTTTTGTCAAGACCGACCTGTCCGGT GCCCTGAATGAACTGCAGGACGAGGCAGCGCGGCTATCGTGGCTGGCCACGACGG GCGTTCCTTGCGCAGCTGTGCTCGACGTTGTCACTGAAGCGGGAAGGGACTGGCT GCTATTGGGCGAAGTGCCGGGGCAGGATCTCCTGTCATCTCACCTTGCTCCTGCC GAGAAAGTATCCATCATGGCTGATGCAATGCGGCGGCTGCATACGCTTGATCCGG CTACCTGCCCATTCGACCACCAAGCGAAACATCGCATCGAGCGAGCACGTACTCG GATGGAAGCCGGTCTTGTCGATCAGGATGATCTGGACGAAGAGCATCAGGGGCTC GCGCCAGCCGAACTGTTCGCCAGGCTCAAGGCGCGCATGCCCGACGGCGAGGATC TCGTCGTGACCCATGGCGATGCCTGCTTGCCGAATATCATGGTGGAAAATGGCCG CTTTTCTGGATTCATCGACTGTGGCCGGCTGGGTGTGGCGGACCGCTATCAGGAC ATAGCGTTGGCTACCCGTGATATTGCTGAAGAGCTTGGCGGCGAATGGGCTGACC GCTTCCTCGTGCTTTACGGTATCGCCGCTCCCGATTCGCAGCGCATCGCCTTCTA TCGCCTTCTTGACGAGTTCTTCTGAGCGGGACTCTGGGGTTCGAATAAAGACCGA CCAAGCGACGTCTGAGAGCTCCCTGGCGAATTCGGTACCAATAAAAGAGCTTTAT TTTCATGATCTGTGTGTTTGTTTTTGTGTGCGGCGCG GAAGTTCCTATTCTCTAG AAAGTATAGGAACTTCCTCGAGCCCTATAGTGAGTCGTATTA