Kerafast EC1001說明書

Kerafast是一家總部位于波士頓的試劑公司，其主要任務是使科學界可以輕松訪問*的實驗室制造的研究工具。我們的產品組合包括細胞系，抗體，小分子，染料等，其中許多是其他地方所沒有的。自2011年成立以來，來自190多個機構的研究人員已通過我們的在線平臺提供了創新試劑，該平臺可快速訪問材料，而無需經過傳統的“材料轉讓協議”流程。

我們為提供實驗室處理所有的銷售和運輸物流，并從每次銷售中返還豐厚的特許權使用費。因此，我們有助于為實驗室節省時間和資源，同時為進一步的研究產生額外的資金。采購科學家可以更輕松地發現和獲取通常在其他地方無法獲得的*試劑，同時還可以資助其他研究人員的工作。這創建了一個由科學家組成的社區，這些科學家為更大的利益貢獻和獲取試劑，以促進他們自己的研究以及整體科學進步。

2018年，Kerafast與英國公司Absolute Antibody合并，其愿景是向所有研究人員提供重組抗體技術。合并使兩家公司共同致力于改善科學界可用的研究工具的選擇。

Kerafast EC1001說明書

LOBSTR E. coli Expression Strain

LOBSTR大腸桿菌表達菌株

LOBSTR（低背景菌株）是一種用于表達重組多組氨酸標簽蛋白的大腸桿菌菌株。該菌株已針對一步下游多組氨酸標簽親和純化進行了優化，是表達能力差的蛋白質的理想選擇。

強調：

• 通過減少大腸桿菌 ArnA和SlyD 的污染，獲得更高純度的重組多組氨酸標簽蛋白
• 一步純化即可消除主要的大腸桿菌污染物
• 基于BL21（DE3）-與其他市售感受態細胞相同
• 純化具有挑戰性的低表達蛋白靶標的理想選擇
• 也可用：BL21（DE3）-RIL版本-包含argU，ileY和leuW tRNA基因的額外副本，以及氯霉素標記

大腸桿菌中表達的蛋白質的多組氨酸標簽親和純化的主要缺點是天然富含組氨酸的蛋白質的存在，導致這些污染物的共純化。在LOBSTR，ArnA和SlyD中，兩種常見的大腸桿菌污染物已根據表面工程進行了修改。LOBSTR維持正常的細胞生長，但顯著降低了ArnA和SlyD的多組氨酸標簽結合親和力。與其他表達菌株相比，LOBSTR可產生更高純度的重組蛋白，可一步純化低表達的重組蛋白。

來自麻省理工學院Thomas U. Schwartz博士的實驗室。

產品規格

數據

LOBSTR和親本BL21（DE3）菌株顯示可比的增長

從0小時的初始同步直到終收獲，測量了LOBSTR和親本BL21（DE3）菌株的生長（OD600）。兩種菌株均攜帶相同的表達質粒，并在37°C下生長直至OD600?0.7，此時在18、25和37C下誘導蛋白質表達（黑色箭頭）。LOBSTR和BL21（DE3）的生長曲線分別以紅色和黑色顯示。兩種菌株在對數期和終細胞密度期間的細胞生長相似。取決于表達質粒，觀察到不同的生長行為，但通常在LOBSTR和BL21（DE3）之間未觀察到生長差異。

從LOBSTR的His-tag純化中去除了ArnA和SlyD

顯示了使用普通金屬親和力樹脂從BL21（DE3）和LOBSTR純化得到的測試樣品。（A）使用Ni Sepharose 6FF樹脂（GE Healthcare）從親本BL21（DE3）菌株和LOBSTR中純化出七個蛋白質構建體。該構建體編號為1-7，并含有6×His標簽（1和4）或10×His標簽（2、3、5→7）。洗脫樣品在SDS-PAGE凝膠上電泳，并用考馬斯藍R250染色。ArnA和SlyD用箭頭表示，靶蛋白用黑圈（△）表示。雙星號（**）表示Hsp15，這是另一種蛋白質，在LOBSTR中顯示出降低的Ni結合親和力。（B）還在兩種另外的常用樹脂Ni-NTA（Qiagen）和Talon（Clontech）上從BL21（DE3）和LOBSTR純化構建體1和5。在每種情況下，

改編自： Andersen KR等。蛋白質。2013年11月; 81（11）：1857-61。