adarbiotech環氧活化珠說明書

成立于2006年3月的Adar Biotech是下一代醫療技術的開發商。該公司開發了用于增強藥物輸送的微型醫療設備，并開發了另一種具有國土安全/生物應用的醫療設備。該公司還向研究團體提供產品和服務。Adar Biotech生產功能性樹脂和重組蛋白，并為客戶提供免疫學和細胞培養服務。

adarbiotech環氧活化珠說明書

環氧活化珠

Epoxy-Activated Beads

Adar的環氧活化微珠是一種通用產品，可將胺和含羥基的配體與微珠上存在的游離環氧基結合。就配體結合而言，所得的連接既穩定又起作用。

Epoxy-Activated Beads Cat. 1004-5/10/25

多用途激活支持版本。1.2 2007年3月

介紹

環氧活化珠是一種含有高密度環氧基的預活化載體，用于固定各種配體。通過與氨基、硫醇和羥基的穩定連接，該載體可用于固定蛋白質、碳水化合物和各種配體。當ph值為11-13時，與羥基的偶聯反應為有利，而含巰基的配體在ph值為7.5-9.0時，偶聯反應為有利。

環氧樹脂活化珠特性

基質：sepharose cl-4b

活性組：Oxiran。

活性組密度：10–25μmole/ml

珠徑：45-165微米

珠狀結構：高度交聯的球形瓊脂糖，6%

大背壓：0.3Mpa，3bar

大流速：4ml/min/cm~2

建議流速：1-2ml/min/cm~2

基質穩定性：ph 2-11。

方案：將配體固定在環氧樹脂活化的珠上

A.所需緩沖器

通常在碳酸鹽、硼酸鹽或磷酸鹽緩沖液中進行耦合。鈉

氫氧化物可用于提高緩沖劑。避免使用含有三胺或游離胺的緩沖劑。

結合過程中的緩沖液和其他親核試劑，因為這些基團可能與

環氧基。如果需要有機溶劑溶解配體，

二甲基甲酰胺和二氧六環的用量可達終體積的50%。這個

相同濃度的有機溶劑應包含在

以避免配體在偶聯過程中沉淀。

配體與10毫升環氧活化珠結合所需的緩沖液。

一。雙蒸餾水（100毫升）。

2.耦合緩沖液（50ml）：碳酸氫鈉或碳酸鹽緩沖液ph-8-10。也可使用中性共軛緩沖液，但宜使用堿性偶聯緩沖液：使用DDH2O或磷酸鹽緩沖液，如PBS。

三。封閉液（100毫升）：1米乙醇胺，pH值8.0。

四。洗滌緩沖液（200毫升）：PBS pH 7.4。

B.協議

一。輕輕混合珠子，形成均勻的混合物，并用吸管移走所需數量的珠子。用雙蒸餾水清洗珠子3次。洗滌可以使用合適的濾漏斗或通過每分鐘1分鐘的離心循環進行，在大約600～1000 xg下進行。不要超過1000xg，因為珠子可能會變形。

2.在耦合緩沖液中溶解配體?？墒褂糜袡C溶劑。對于大配體（即分子量大于10000的蛋白質），制備2-10 mg/ml的溶液；對于小配體，例如小肽，制備每ml耦合緩沖液中至少200μmoles配體的溶液。

三。將兩體積的配體溶液加入到一體積的洗滌環氧樹脂中

在聚丙烯管和輕輕混合珠。樣品100ul上清液

（不含珠子）在時間零點作為參考樣品并保存在冰箱中。

四。在4oC至45℃之間緩慢混合（配體的穩定性限制頂線溫度），優選使用搖臂。不要用磁力攪拌器攪拌

5。樣品100ul上清液（不含珠子）的接合效率

利用耦合緩沖液去除未結合的生物分子，測定并清洗多余的配體。

6.加入大約兩個凝膠體積的封閉溶液。放置至少4小時或在4℃下過夜。

7號。在室溫下用20體積的清洗緩沖液清洗凝膠三次，以去除未粘合的乙醇胺。

C.儲存

將凝膠冷藏在磷酸鹽緩沖鹽（PBS）或添加0.1%疊氮化物（W/V）作為防腐劑的其他配體兼容緩沖液中，直至使用。