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    invivogen Zeocin說明書

     更新時間:2021-08-19 點(diǎn)擊量:2792


    invivogen Zeocin說明書

    Zeocin

    Zeocin™ (solution)Unit sizeCat. code
    Selective antibiotic for the Sh ble gene
    500 mg (5 x 1ml)
    1g (10 x 1 ml)
    5g (50 x 1 ml)
    5 g (50 ml bottle)
    ant-zn-05
    ant-zn-1
    ant-zn-5
    ant-zn-5b
    Zeocin™ (powder)Unit sizeCat. code
    Selective antibiotic for the Sh ble gene
    1 g (powder)
    5 g (powder)
    ant-zn-1p
    ant-zn-5p


    Zeocin™ | 選擇抗生素:內(nèi)毒素檢測,無菌試劑

    InvivoGen 是全球的 Zeocin™ 生產(chǎn)商。

    Zeocin™ 是腐草霉素D1的制劑,一種由Streptomyces CL990生產(chǎn)的銅螯合糖肽抗生素 。 Zeocin™ 通過嵌入 DNA 并切割 DNA 來導(dǎo)致細(xì)胞死亡。
    Zeocin™ 的作用對大多數(shù) 需氧細(xì)胞有效因此,Zeocin™ 是一種流行且有效的抗生素,用于 在各種細(xì)胞類型(細(xì)菌、真核微生物、植物和動物細(xì)胞)中選擇帶有Sh ble基因的載體 

    Zeocin™ 抗性是由來自印度鏈球菌Sh ble基因產(chǎn)物賦予的,它在與抗生素結(jié)合后使 Zeocin™ 失活 [1-3]。Sh ble是一個 370bp 大小的小基因,在許多 InvivoGen 的載體中都攜帶。 

    通常,哺乳動物細(xì)胞對 50-400 µg/ml 的 Zeocin™ 濃度敏感,而細(xì)菌對 25 µg/ml 的濃度敏感。

    僅供研究使用

    參考:

    1. Drocourt D. 等,1990。用于將低等和高等真核生物轉(zhuǎn)化為腐草霉素抗性的 Streptoalloteichus hindustanus ble 基因盒。核。酸。水庫 18: 4009。2 
    . Gatignol A. 等人,1988 年。FEBS快報。230:171-5。
    3. Dumas P. 等,1994. Embo J. 242 (5) 595-601。

    InvivoGen 的 Zeocin™InvivoGen 的 Zeocin™
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    規(guī)格

    產(chǎn)品濃度:  100 mg/ml 溶液

    CAS號: 11006-33-0

    質(zhì)量控制:每個批次都經(jīng)過*測試,以確保沒有批次間的差異。

    內(nèi)毒素水平: < 1 EU/mg

    理化表征: HPLC、pH、外觀

    細(xì)胞培養(yǎng)測試:在 Zeocin™ 敏感和 Zeocin™ 抗性哺乳動物細(xì)胞系中驗(yàn)證效力

    微量污染物的非細(xì)胞毒性:在 Zeocin™ 抗性細(xì)胞中證實(shí)沒有長期影響

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    內(nèi)容

    Zeocin™ 以無菌過濾藍(lán)色溶液的形式提供,濃度為 100 mg/ml,在 HEPES 緩沖液中。

    本產(chǎn)品提供三種包裝尺寸:

    • ant-zn-1: 10 x 1 毫升(1 克)

    • ant-zn-5: 50 x 1 毫升(5 克)

    • ant-zn-5b: 1 x 50 毫升(5 克)

    Zeocin™ 也以藍(lán)色粉末形式提供:

    • ant-zn-1p: 1 x 1 克

    • ant-zn-5p: 1 x 5 克

    Zeocin™ 在室溫下運(yùn)輸。

    收到后應(yīng)在 4°C 或 -20°C 下儲存。

    Zeocin™ 是一種有害化合物。有關(guān)操作說明,請參閱安全數(shù)據(jù)表。

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    細(xì)節(jié)

    工作濃度

    Zeocin™ 通常以 100 μg/ml 的濃度使用,是原液的 1000 倍稀釋液。但是,需要為您的細(xì)胞確定最佳濃度。
    下面列出了在某些哺乳動物細(xì)胞示例中選擇的 Zeocin™ 的建議濃度:

    細(xì)胞系

    中等的

    Zeocin™ 濃

    參考

    B16(小鼠黑色素細(xì)胞)

    RPMI

    20-250 微克/毫升

    1-3

    CHO(中國倉鼠卵巢細(xì)胞)

    DMEM

    100-500 微克/毫升

    1、4、5

    COS(猴腎細(xì)胞)

    DMEM

    100-400 微克/毫升

    6、7

    HEK293(人胚胎腎細(xì)胞)DMEM100-400 微克/毫升8、9
    HeLa(人類子宮細(xì)胞)DMEM50-100 微克/毫升10、11
    J558L(小鼠黑色素細(xì)胞)RPMI400 微克/毫升12
    MCF-7(人乳腺腺癌細(xì)胞)DMEM100-400 微克/毫升13、14
    MEF(小鼠胚胎成纖維細(xì)胞)DMEM200-400 微克/毫升15、16
    THP-1(人類單核細(xì)胞)RPMI200 微克/毫升17

    參考:

    1. Bouayadi K. 等,1997。DNA 聚合酶 beta 的過度表達(dá)使哺乳動物細(xì)胞對 2',3' 脫氧胞苷和 3'-疊氮基-3'-脫氧胸苷敏感。癌癥研究。57:110-116。
    2 Hirose Y. 等人,2012 年。抑制 Stabilin-2 可提高循環(huán)透明質(zhì)酸水平并防止腫瘤轉(zhuǎn)移。PNAS, 109: 4263 - 4268. 
    3. Fan H. et al., 2012. 使用碳納米管的腦內(nèi) CpG 免疫療法消除了小鼠皮下黑色素瘤的生長。臨床癌癥研究 18(20):5628-38。
    4. Li F. 等人,1996 年。重組 P 選擇糖蛋白配體 1 的翻譯后修飾,這是與 P 和 E 選擇結(jié)合所需的。J.生物。化學(xué) 271:3255-3264。
    5. Ogura T. 等人,2004 年。B16 黑色素瘤細(xì)胞對 CD47 誘導(dǎo)的運(yùn)動負(fù)調(diào)節(jié)的抗性,這是由于 SHPS-1 的異常 N-糖基化所致。J 生物化學(xué)。279(14):13711-20。
    6. Saxena A. 等,2002。H2,人類去唾液酸糖蛋白受體的次要亞基,在細(xì)胞內(nèi)運(yùn)輸并形成同源寡聚體,但不結(jié)合去唾液酸-口粘蛋白。J 生物化學(xué)。277(38):35297-304。
    7. Kanamori A. 等人,2002. 使用支持所有三種選擇素在剪切流下介導(dǎo)的滾動的細(xì)胞公開了選擇素的不同硫酸化要求。L-選擇素更喜歡碳水化合物 6-硫酸化酪氨酸硫酸化,而 p-選擇素則不然。J 生物化學(xué)。277(36):32578-86。
    8. Ahmed 等人,2013 年。TRIF 介導(dǎo)的 TLR3 和 TLR4 信號傳導(dǎo)受到 ADAM15 的負(fù)調(diào)控。J免疫學(xué)。190(5):2217-28。
    9. Büllesbach EE。& Schwabe C.,2006。松弛素樣因子 (RLF) 與富含亮氨酸重復(fù) G 蛋白激活受體的相互作用模式 8。J Biol Chem。281(36):26136-43。
    10. Mesnil M. et al., 1996. 單純皰疹病毒胸苷激酶基因?qū)Π┘?xì)胞的旁觀者殺傷是由連接蛋白介導(dǎo)的。PNAS 93(5):1831-5。
    11. Maszczak-Seneczko D. 等人,2013 年。UDP-N-乙酰氨基葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 (SLC35A3) 調(diào)節(jié)高度支化 N-聚糖和硫酸角質(zhì)素的生物合成。J 生物化學(xué)。288(30):21850-60。
    12. Cedeno-Laurent F. 等人,2010 年。開發(fā)用于研究白細(xì)胞 galectin-1 配體和免疫疾病調(diào)節(jié)作用的新生 galectin-1 嵌合分子。J免疫學(xué)。185(8):4659-72。
    13. 金 HS。等人,2004 年。胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白 3 通過 MCF-7 人乳腺癌細(xì)胞中的死亡受體介導(dǎo)途徑誘導(dǎo)半胱天冬酶依賴性細(xì)胞凋亡。癌癥研究。64(6):2229-37。
    14. 列出 HJ。等人,2001 年。核酶靶向表明核受體輔激活因子 AIB1 是人類 MCF-7 乳腺癌細(xì)胞雌激素依賴性生長的限速因子。J 生物化學(xué)。276(26):23763-8。
    15. Waak J. 等,2009。介導(dǎo)蛋白質(zhì)穩(wěn)定性和 DJ-1 與細(xì)胞凋亡信號調(diào)節(jié)激酶 1 的細(xì)胞保護(hù)相互作用的可氧化殘基。J Biol Chem。284(21):14245-57。
    16. Maue A. 等人,2013 年。空腸彎曲桿菌的多糖膠囊調(diào)節(jié)宿主免疫反應(yīng)。感染免疫。81(3):665-72

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    常見問題

    你們提供的 Zeocin™ 是鹽酸還是硫酸鹽?

    我們提供鹽酸 Zeocin™。


    Zeocin™ 是光敏的嗎?
    不,Zeocin™ 不具有光敏性。


    Zeocin™ pH 值敏感嗎?
    Zeocin™ 在低和高 pH 值(<6 和 >8)或弱氧化劑存在下會發(fā)生不可逆的變性。


    什么緩沖液可用于稀釋 Zeocin™ 以制備中間工作溶液?
    應(yīng)在無菌水中進(jìn)一步稀釋,以創(chuàng)建中間工作溶液。


    用于重構(gòu) Zeocin™ 的 HEPES 緩沖液的濃度是多少?
    用于重構(gòu) Zeocin™ 的 HEPES 緩沖液濃度為 5 g/L。


    Zeocin™ 的儲存方法是什么?
    Zeocin™ 在室溫下運(yùn)輸。收到后,應(yīng)在 4°C 下短期儲存或在 -20°C 下長期儲存。
    避免重復(fù)的凍融循環(huán)。
    有效期在產(chǎn)品標(biāo)簽上注明。
    對于 Zeocin™ 粉末,一旦以 100 mg/ml 重懸,它可以在 4°C 下儲存 12 個月或在 -20°C 下儲存 18 個月。
    對于 Zeocin™ 溶液,一旦打開,它可以在 -20°C 下保持穩(wěn)定 1 年,避免重復(fù)凍融循環(huán),如果保持在無菌條件下,它可以在 4°C 下保存 3 個月。


    Zeocin™ 在哺乳動物細(xì)胞中的選擇濃度是多少?
    Zeocin™ 在哺乳動物細(xì)胞系中的工作濃度在 50 - 400 μg/ml 之間變化,有少數(shù)報道使用較低(即 20 μg/ml)和較高(即 1000 μg/ml)濃度的案例。在初始實(shí)驗(yàn)中,我們建議確定殺死宿主細(xì)胞系所需的最佳 Zeocin™ 濃度。有關(guān)更多詳細(xì)信息,請參閱該產(chǎn)品的技術(shù)數(shù)據(jù)表。


    Zeocin™ 在大腸桿菌中的選擇濃度是多少?
    在補(bǔ)充有 25 μg/ml Zeocin™ 的低鹽 LB 瓊脂中選擇 Zeocin 抗性轉(zhuǎn)化體。
    重要提示:不要使用含有 Tn5 轉(zhuǎn)座因子(即 MC1066)的大腸桿菌受體菌株。Tn5 編碼一種博萊霉素抗性基因,可賦予 Zeocin™ 抗性。

     


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