IUB：3.1.21.1
牛胰腺脫氧核糖核酸酶是一種核酸內切酶，它分裂磷酸二酯鍵，優(yōu)先與嘧啶核苷酸相鄰，產生在 3' 位置具有游離羥基和在 5' 位置具有磷酸基團的多核苷酸。限制消化的平均鏈長是四核苷酸。
用途：Worthington 為不同的應用提供不同純度水平的 DNase。產品代碼：DPRF 和 DPRFS 均專為分子生物學應用而設計，并且含有低水平的 RNase 和蛋白酶活性。它們都適用于需要消化 DNA 以回收完整 RNA 或必須保持結構蛋白或酶完整性的技術。應用包括切口平移、DNA 作圖、核 RNA 和蛋白質的分離、質粒構建以及 RNA 探針和 RT-PCR 的 RNA 聚合酶合成。DNase 還用于組織培養(yǎng)工作以消化受損細胞中的 DNA，從而降低粘度并去除膜結合的 DNA 片段。沃辛頓代碼：DP 和 DCLS 適用于這些應用。
穩(wěn)定性/存儲：如果儲存得當，所有等級的 Worthington 脫氧核糖核酸酶都可以穩(wěn)定保存 2-3 年。所有等級的 Worthington DNA 酶的推薦儲存溫度為 2-8°C。產品代碼 DPRFS 可在 -20°C 下儲存。為了長期保存在溶液中，產品代碼 D 和 DPFF 可以溶解在 5mM 醋酸鹽、1mM 鈣、pH 4.5 中，并以一次性等分試樣在 -20°C 或 -70°C 下保存長達一年。只凍融一次；解凍的等分試樣可穩(wěn)定冷藏至少數周。添加 50% 甘油將在 -20°C 下保持液態(tài)而不影響穩(wěn)定性，并且可以將 50% 甘油中的材料去除并重復返回到 -20°C。由于不存在蛋白酶，DPRF異常穩(wěn)定。對于重組后的 DPRF 的長期儲存，使用水或任何 pH 值 4.0 至 9.0 的緩沖液（磷酸鹽除外）；避免鈣螯合劑；添加 50% 甘油，在 -20°C 下以液體形式儲存；分裝在一次性容器中；只凍融一次；解凍的等分試樣可穩(wěn)定冷藏至少數周。
單位定義：當作用于 pH 5.0 的高度聚合的 DNA 時，1 個單位在 25°C 下導致 260nm 吸光度每分鐘每毫升增加 0.001。 注意：其他供應商報告的 Kunitz 單位可能比在 Worthington 測量的 Kunitz 單位高 2 到 4 倍。在 Worthington 測得，一個 Kunitz 裝置在 37°C 的 50mM Tris、1mM Mg 2+、1mM Ca 2+、pH 7.8 的 50µl 反應體系中在 10 分鐘內消化 1µg 的 λ DNA。對于其他 DNA 和緩沖系統(tǒng)，消化單位與 Kunitz 單位的相關性是不同的。
技術說明： 產品代碼 DPRF：每瓶每 10,000 單位 DNase I 含有大約 2mg 甘氨酸和 2µmoles 鈣。將整個小瓶溶解在 5ml 中相當于 1mg/ml 溶液。
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