jembio末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶 (TdT說明書)

jembio末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶 (TdT說明書)                jembio末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶 (TdT) 是一種不依賴模板的聚合酶，它催化將脫氧核糖核苷酸單磷酸從三磷酸鹽添加到 DNA 的 3' 羥基末端。 描述：• 優(yōu)選的底物是：單鏈DNA、帶有3'-羥基末端的雙鏈DNA和寡脫氧核苷酸引物(1)。• 用于用核糖核苷酸對 3'-末端進(jìn)行特異性標(biāo)記 (2)。• 用[a-32P] 3'-脫氧核苷(3) 標(biāo)記DNA 片段的3'-末端。• 將脫氧核糖核苷酸的均聚物尾部添加到載體或 cDNA (4,5)。單位定義：一個單位定義為在 37°C 下 1 小時內(nèi)將 1 nmol dAMP 從 dATP 轉(zhuǎn)移到寡脫氧核糖核苷酸引發(fā)劑 p(dA)50 的 3'-OH 末端所需的酶量。 儲存條件：儲存于-20°C。 儲存緩沖液：100 mM Tris-HCl（22°C 時 pH 7.2）、1 mM 二硫蘇糖醇和 50% (v/v) 甘油。 檢測條件：40 mM 二甲胂酸鉀 (pH 7.2)、8 mM MgCl2、8.3 mM 磷酸鉀、0.33 mM ZnSO4、10 mg/ml 牛血清白蛋白、0.01 mM 寡脫氧核苷酸 p(dA)50 和 1 mM [a-32P]dATP在 37oC 下 1 小時內(nèi)，反應(yīng)體積為 60 µl。 質(zhì)量控制：所有制劑都經(jīng)過核酸內(nèi)切酶、核酸外切酶和非特異性 RNase 以及單鏈和雙鏈 DNase 活性測試。