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    Elastase - Manual

     更新時間:2022-10-31 點擊量:1206

    Elastase - Manual

    歷史

    Eijkman被認為是第一個研究彈性蛋白酶作為細菌產物的人(Eijkman 1904)。然而,直到1949年Baló和Banga發表,它才被證明與胰腺的其他蛋白水解成分(如胰蛋白酶和糜蛋白酶)不同。

    1968年,肖頓和哈特利是第一個獲得結晶豬彈性蛋白酶的人。在1960年代末和1970年代初,研究了彈性蛋白酶在肺氣腫,動脈粥樣硬化和急性出血性胰腺炎中的參與(Janoff和Sherer 1968,Janoff和Basch 1971,Talamo等人1971,Kaplan等人1973年和Bieth等人1974)。1974年,Ardelt發現了第二種彈性分解蛋白酶,將其命名為胰腺“彈性蛋白酶II"和原始的“彈性蛋白酶I"。

    在20世紀80年代,研究了彈性蛋白酶的催化性質(Ascenzi等人,1983年),并鑒定了抑制劑(Largman等人,1980年,Lestienne等人,1981年,凱特納和申維1984年,Poncz等人1984年,帝國和阿貝爾斯1986年)。1990年代對彈性蛋白酶I和II遺傳信息進行了研究(Ornitz等人,1985年,史蒂文森等人1986年,斯威夫特等人1984年,塔尼等人1987年和蓋斯汀等人1997年)。

    彈性蛋白酶最近已用于研究細胞外基質分解中的機械力和酶活性(Jesudason等人,2010)。它還研究了它在人工器官發育中的應用(Tedder等人,2010),并被用作研究絲氨酸蛋白酶催化活性的模型(Tamada等人,2009)。

    概述

    國際單位: 3.4.21.36

    豬胰彈性蛋白酶的分子量為25.9 kDa,pH值為8.5。雖然彈性蛋白酶將水解各種蛋白質底物,但它在蛋白酶中的特別之處在于其水解天然彈性蛋白的能力,彈性蛋白酶是一種不受胰蛋白酶,糜蛋白酶或胃蛋白酶攻擊的底物。大豆胰蛋白酶抑制劑和激肽釋放酶抑制劑抑制蛋白水解物,但不抑制彈性水解活性。彈性蛋白酶是使用改編自范斯坦等人生物化學的方法測定的。生物物理學。Res. Comm., 50, 1020 (1973) 和使用 Bieth 等人的更可溶性底物, 生物化學醫學, 11, 350 (1974).

    穩定性/儲存性:彈性蛋白酶在pH≤3.5時不穩定。當作為干粉儲存時,酶在2-8°C下穩定6-12個月。 彈性蛋白酶產品代碼:ES和ESL在中性pH和濃度大于0.25%時溶解度較差。在稀釋到反應混合物或介質中之前,在KCl或堿性緩沖液中制備初級溶液是有幫助的,以補償離子強度或pH值的變化。在pH 4.0-10.4下穩定。

    技術說明:1個SucAla3NA單位大約相當于6個彈性蛋白消化單位。水性液體懸浮液應無菌處理,以避免細菌污染。由于水懸浮液(代碼:ES)的粘性,應沖洗小瓶以回收內容物。

    特異性

    豬彈性蛋白酶I對Ala-Ala和Ala-Gly鍵具有特異性,而彈性蛋白酶II對P1位置的中到大型疏水性氨基酸的底物具有廣泛的特異性(Gertler等人,1977年,Del Mar等人,1980年和Gestin等人,1997年)。豬彈性蛋白酶是有效的彈性蛋白酶,其速率比人類白細胞彈性蛋白酶高20倍(Bieth 1978,Bieth 1986和Largman 1983)。

    水解分幾個步驟發生。彈性蛋白酶與其底物之間形成吸附復合物,隨后形成親核攻擊(S214)以形成酰基輔酶中間體,并釋放出第一產物(底物的C端)。中間體在脫酰化步驟中水解,再生活性酶并釋放第二種產物(Bieth 1986)。

    組成

    催化三元組由三個氫鍵氨基酸殘基(H71,D119和S214)形成。多肽鏈由兩個反平行的β-桶結構域組成,它們形成含有催化三元組的裂縫和一小部分α-螺旋(Bieth 2004)。

    分子特性

    豬胰彈性蛋白酶由240個氨基酸的單肽鏈組成,并含有4個二硫橋(Sawyer等人,1973)。它與來自其他物種的胰腺彈性蛋白酶具有高度的序列同一性,例如與它共享86%身份的大鼠(MacDonald等人,1982)。彈性蛋白酶I和II基因共享序列相似性,特別是在5'近端側翼區域,其中包括TATA盒和推定的組織特異性增強子序列(Ornitz等人1985年,史蒂文森等人1986年,Swift等人1984年,塔尼等人1987年和Gestin等人1997年)。

    應用

    組織解離:由于彈性蛋白在結締組織的彈性纖維中含量高,因此彈性蛋白酶經常用于解離含有廣泛細胞間纖維網絡的組織。為此,它通常與其他酶一起使用,例如膠原酶,胰蛋白酶和糜蛋白酶。

    膜蛋白增溶

    蛋白質序列研究

    產品詳情

    名稱    Elastase - Manual

    編號    LS002292

    品牌    Worthington



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