biosearchtech RP8092H說(shuō)明書(shū)

　更新時(shí)間：2022-11-01　點(diǎn)擊量：1101

RNA 5' Polyphosphatase

產(chǎn)品概述

去磷酸化三磷酸化和二磷酸化的RNA分子，同時(shí)避免5'封端和單磷酸化的RNA。

產(chǎn)品特點(diǎn)

去磷酸化 5'-三磷酸化 RNA，例如原代 RNA 轉(zhuǎn)錄本，但不能去磷酸化 5'-帽的 mRNA

特異性：從 5'-三磷酸化 RNA 中去除γ和β磷酸鹽，從二磷酸化 RNA 中去除β磷酸鹽，但不會(huì)去磷酸化單磷酸化或 5'-封端的 RNA

熱滅活：在65°C下加熱20分鐘以殺死酶活性

靈活：適用于各種應(yīng)用，例如使用 T4 RNA 連接酶進(jìn)行 5'-RNA 連接標(biāo)記、分析 RNA 的 5'-末端結(jié)構(gòu)以及制備底物 RNA 以便隨后使用終止子 5'-磷酸依賴(lài)性核酸外切酶降解

產(chǎn)品信息

RNA 5' 多磷酸酶* 是一種鎂2+-由震中科學(xué)家發(fā)現(xiàn)和表征的獨(dú)立磷酸水解酶。該酶依次去除 5'-三磷酸化 RNA 中的γ和β磷酸鹽（例如初級(jí) RNA 轉(zhuǎn)錄本）：

5' pppN—OH 3' 至 ;5' pN—OH 3' + 2 P我

具有5'-二磷酸化末端的RNA也通過(guò)RNA 5'多磷酸酶：5'ppN—OH 3'轉(zhuǎn)化為5'-單磷酸化RNA;

5' pN—OH 3' + P我

RNA 多磷酸酶對(duì) 5' 帽（例如 5' m 的 RNA 沒(méi)有活性7GpppN—OH 3'），或5'-單磷酸化末端（5' pN—OH 3'）。然而，NTP和dNTPs都是酶的底物，產(chǎn)生相應(yīng)的NMP和dNMPs+無(wú)機(jī)磷酸鹽：（d）NTP至;（四）NMP + 2P我

應(yīng)用

將 5'-三磷酸化 RNA 轉(zhuǎn)化為 5'-單磷酸化 RNA，用于使用 T4 RNA 連接酶的 5'-RNA 連接標(biāo)記方法。

RNA的5'端結(jié)構(gòu)分析。

使用震中終止子™ 5'-磷酸依賴(lài)性核酸外切酶制備底物RNA分子以進(jìn)行后續(xù)降解。

*涵蓋已頒發(fā)和/或正在申請(qǐng)的專(zhuān)li。

產(chǎn)品規(guī)格及用途

單位定義：在標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定條件下，一個(gè)單位的RNA 5'多磷酸酶在37°C下1小時(shí)內(nèi)從ATP釋放1nmol的無(wú)機(jī)磷酸鹽。

儲(chǔ)存緩沖液：50% 甘油，含有 0.05 M Tris-HCl （pH 7.5）、0.1 mM EDTA、1 mM DTT、0.1 M NaCl 和 0.1% Triton X-100。®

10X 反應(yīng)緩沖液：0.5 M HEPES-KOH （PH 7.5）、1 M 氯化鈉、10 mM EDTA、1% β-巰基乙醇和 0.1% Triton X-100。®

滅活/抑制劑：RNA 5' 多磷酸酶被 100 mM 無(wú)機(jī)磷酸鹽抑制 ~50% （P我），使用ATP作為底物。

質(zhì)量管理：RNA 5' 多磷酸酶不含可檢測(cè)的 DNA 外切酶和核酸內(nèi)切酶以及 RNase 活性。

產(chǎn)品詳情