aatbio AAT-21055說明書

Fura-8™, AM

產(chǎn)品概述

盡管Fura-2已成為shou選的激發(fā)比鈣指示劑，但它具有一定的局限性（例如，靈敏度低于單波長鈣指示劑，如Fluo-8®和Cal-520®）。為了解決這些問題，亞洲空運(yùn)中心Bioquest投入了大量精力開發(fā)Fura™ 8，這是一種高親和力比例鈣指示劑，具有更高的靈敏度和更高的信噪比。Fura 8的熒光發(fā)射紅移到更長的可見光波長，便于通過普通濾光片組檢測Fura™™ 8。Fura™ 8，AM是膜通透性的，在355nm和415nm處激發(fā)，在530nm處發(fā)射。

熒光顯微鏡

興奮 呋喃 2 過濾器套件 

排放 呋喃 2 過濾器套件 

推薦板 黑色墻壁/透明底部 

熒光酶標(biāo)儀

興奮 355, 415 

排放 530 

近路 475 

推薦板 黑色墻壁/透明底部 

儀器規(guī)格 底部讀取模式/可編程液體處理 

儲備溶液的制備

除非另有說明，否則所有未使用的儲備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣，并在制備后儲存在-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。

呋喃-8™ AM 儲備液

在高質(zhì)量無水DMSO中制備2至5 mM的Fura-8™ AM儲備溶液。

實驗方案樣本

以下是我們推薦的將AM酯加載到活細(xì)胞中的方案。此協(xié)議僅提供指南，應(yīng)根據(jù)您的特定需求進(jìn)行修改。在生長培養(yǎng)基中制備細(xì)胞過夜。

第二天，將1X Fura-8™ AM工作溶液添加到細(xì)胞板中。

注意如果您的化合物干擾血清，請在上樣染料之前用新鮮的 HHBS 緩沖液替換生長培養(yǎng)基。

將裝載染料的板在37°C的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育30至60分鐘。

注意孵育染料超過 1 小時可以改善某些細(xì)胞系的信號強(qiáng)度。

用您選擇的HHBS或緩沖液（含有陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抑制劑，如1 mM丙磺舒，如果適用）替換染料工作溶液，以去除任何多余的探針。

根據(jù)需要添加興奮ji，并使用配備Fura 2濾光片組的熒光顯微鏡或包含可編程液體處理系統(tǒng)（如FlexStation）的熒光板讀數(shù)器在Ex/Em下同時測量熒光1= 355/530 nm 截止值 475 nm 和防爆/電磁2= 415/530 nm 截止值 475 nm。

產(chǎn)品詳情

名稱     Fura-8™, AM

編號    AAT-21055

品牌     aatbio