支原體清除試劑1(1000x)說明書

支原體清除試劑1(1000x)說明書

上海起發生物科技有限公司（Shanghai BioHub Biotechnology Co., Ltd.）屬于上海起發實驗試劑有限公司（2009年成立）旗下的子公司，成立的初衷是建立上海起發生物自有品牌，打造優質的生物試劑民族自有品牌。降低成本的同時，把好生物產業鏈中的國產生物試劑品質關。未來讓每一個和我們一樣擁有民族情懷的企業，共同創世界優秀的中國生物制造企業，圓夢中國。

產品詳情

產品描述

本公司開發的支原體清除試劑1含有抑制支原體蛋白質合成的藥物，而支原體清除試劑2含有抑制支原體DNA合成的藥物。由于兩種試劑的作用機理不同，支原體清除試劑1需要處理不少于15天，而支原體清除試劑2只需處理7天。兩者都可以達到殺滅和清除支原體的目的。

使用方法

使用方法

（一）支原體清除試劑 1

1. 使用之前，先將支原體清除試劑1用 PBS或者無血清培養液稀釋10倍后，放 4℃冰箱保存。

2. 將 50-100萬個細胞鋪到 60mm的細胞培養皿內，加入4mL含支原體清除試劑1的正常細胞培養液（使用稀釋 10倍后的支原體清除試劑 1，按 1:100 比例加入）。

3. 每 2-3天更換細胞培養液。換液時，用 PBS沖洗 2-3 遍細胞，以將死亡的支原體清洗干凈。而后加入新鮮的含支原體清除試劑 1 的正常細胞培養液。期間如果細胞密度過大，請保持細胞密度適當（貼壁細胞可能需要胰酶消化），并更換新的培養皿。

4. 處理15天后，可以用支原體檢測試劑盒進行檢測，檢測支原體是否殺滅。如果仍有支原體殘留，可以考慮再處理6天。

5. 以后每隔1個月進行支原體的常規檢測，以保證沒有新的支原體污染。

實驗案例分析

如上圖所示，左側為未經支原體清除試劑處理的人Hela細胞,經DAPI染色后，除了細胞核為藍色外，細胞質也有大量的絮狀核酸物質被染成藍色，這些處于細胞質的核酸物質就是支原體 DNA。而右側為經過本公司的支原體清除試劑2處理7天的 Hela細胞，經DAPI染色后，除了細胞核為藍色外，細胞質沒有任何絮狀核酸物質被染成藍色，說明支原體已經被清除。

注意事項

l 建議將細胞分成三份：第一份添加清除試劑1，第二份添加清除試劑2，第三份同時添加清除試劑1和清除試劑2進行殺滅（注：同時添加兩種藥物可能對細胞的毒性較大，但是殺滅的概率會非常高）， 這樣支原體對兩種藥物同時產生抗性和處理過程中細胞同時死亡的概率會非常低。如果同時添加清除試劑 1 和清除試劑 2，細胞可以每 2 天更換一次培養液。

l 處理過程中，注意每天觀察細胞的狀況，如果發現支原體清除試劑對細胞的毒性較大，可以加大培養液中的血清濃度或者提高細胞的密度。

l 清除試劑1和清除試劑2在降低濃度后（使用稀釋10倍后的支原體清除試劑1或者 2，再按 1:500 比例加入，即藥物的最終稀釋比例為 1:5000）也可以加入到培養液中作為短期（1-2個月）的支原體污染預防藥物，但是不建議在細胞培養液中長期（超過2個月）加入，因為有可能導致對該兩種藥物有抗性的支原體出現。

運輸及保存方法