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    重組豬源RNase抑制劑說明書

     更新時間:2023-04-21 點擊量:706

    重組豬源RNase抑制劑說明書

    上海起發生物科技有限公司(Shanghai BioHub Biotechnology Co., Ltd.)屬于上海起發實驗試劑有限公司(2009年成立)旗下的子公司,成立的初衷是建立上海起發生物自有品牌,打造優質的生物試劑民族自有品牌。降低成本的同時,把好生物產業鏈中的國產生物試劑品質關。未來讓每一個和我們一樣擁有民族情懷的企業,共同創世界優秀的中國生物制造企業,圓夢中國。

    產品詳情

    貨號

    規格

    價格

    78BAB10003-100uL

    100uL(4KU)

    ¥200.00

    78BAB10003-1ml

    1ml (40KU)

    ¥1600.00

    78BAB10003-50ml

    50ml (2MU)

    ¥50000.00

     產品描述

    本產品是以大腸桿菌中進行表達,并通過親和層析純化的重組豬源RNase抑制劑,該蛋白特征與豬肝和人胎盤來源此類酶相似,可替代天然提取 RNase Inhibitor的應用。本產品與RNase A形成1: 1復合體,抑制RNase活性。該反應是可逆的,通過尿素及巰基類試劑能夠解離復合體,使RNase復性而抑制劑不可逆失活。本產品與其它競爭性抑制劑(核酸類,無機磷酸類)不同,可以很容易地通過苯酚處理將其從反應體系中除去,但不能抑制逆轉錄酶的RNase H的活性。使用時可直接加入含有RNA的反應液中用于cDNA第一鏈合成、體外轉錄和體外翻譯等實驗。

    產品特點

    ·       cDNA合成

    ·       體外轉錄

    ·       體外翻譯

    ·       1-Step RT-qPCR

    產品組分

    緩沖液成分:20 mM HEPES-KOH(pH 7.6),50mM KCl,8mM DTT,50% (v/v) glycerol。 

     

    使用方法

    使用方法

    溫馨提示:需要用無RNA酶的PCR管中配制RNA/引物預混液

    1 cDNA合成

     (1)在無RNA酶的PCR管中配制RNA/引物預混液

    組分

    反應體積(10ul)

    Oligo(dT)20

    (或Random primer)

    (或基因特異引物)

    25pmoles

    (25pmoles)

    (5pmoles)

    10mM dNTPs

    2µL

    模板RNA

    2pg-5µg

    DNase/Rnase Free Water

    10ul

     

    (2)65℃加熱5min,立即置于冰上

    組分

    反應體積(10ul)

    RNA引物預混液

    10ul

    5x RT Buffer

    4µL

    BIOHUB Reverse Transcritase

    1ul

    RNase inhibitor(40U/µL)

    1ul

    100mM DTT

    2ul

    DNase/Rnase Free Water

    補足20ul

     

    (3)輕輕混勻,按如下反應條件設置

    逆轉錄反應條件

    1

    42℃

    20-60min

    2

    99℃

    5min

     

    備注:逆轉錄溫度可在42-60之間調整,反應時間建議在20-60min內調整

       

    (4)得到的cDNA溶液可以直接用于第二鏈cDNA合成及后續PCR反應。

    優化參考方法

    優化參數

    參考范圍

    逆轉錄

    50-60℃ 5-15min

    預變性溫度時間

    95-98℃ 10sec-5min

    變性溫度

    95-98℃ 3sec-10sec

    延伸/退火溫度

    60-65℃ 5sec-30sec

     

    注意事項

    1. 本產品在PH7?8時表現最佳抑制RNase活性。

    2. 本產品發揮活性作用至少添加1 mM的DTT。

    3. 本產品不抑制RNase H活性及逆轉錄酶活性。

    運輸及保存方法

     

    -20℃可保存12個月。


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