流式細胞術“顯色神器”：SureLight® R-Phycoerythrin（D5-000）全解析

??產品基礎信息  

貨號：D5-000  

品名：SureLight® R-Phycoerythrin（R-藻紅蛋白）  

規格：10mg、50mg、100mg、500mg

品牌：columbia biosciences

類型：基因工程優化型藻紅蛋白（Phycoerythrin, PE）  

來源：通過紅藻（如紫球藻）藻膽蛋白基因重組表達，經純化工藝制備的高純度熒光蛋白。  

應用領域：流式細胞術（FCM）、熒光免疫分析（如ELISA、免疫組化）、單細胞測序標記、多色熒光檢測等。  

??詳細介紹：從紅藻到實驗室的“顯色明星"  

SureLight® R-Phycoerythrin（R-藻紅蛋白） （D5-000）是一種經典的熒光標記物，其核心功能是通過吸收特定波長光能并發射更長波長的熒光，實現對生物樣本（如細胞、組織）的可視化檢測。  

它的“出身"自帶優勢——以紅藻中的天然藻紅蛋白為模板，通過基因工程技術優化了蛋白折疊效率和色素分子（藻膽素）結合能力，最終得到的R-PE純度≥95%（HPLC檢測），熒光量子產率較傳統提取的PE提升約30%（數據來源：Columbia Biosciences內部測試）。  

從光譜特性看，D5-000的最佳激發波長為480-490nm（適配主流488nm氬離子激光器），發射波長為565-575nm（覆蓋PE-Texas Red雙色檢測窗口），這使得它在流式細胞術中既能單獨標記目標分子，也能與FITC（綠光）、PerCP（橙光）等染料組成多色panel，輕松區分復雜樣本中的不同細胞亞群。  

??核心優勢：為什么科研人更愛D5-000？  

1. 高亮度，低背景：優化的藻膽素-蛋白結合結構減少了非特異性熒光淬滅，相同濃度下熒光強度比市售普通PE高25%-40%（第三方實驗室驗證數據），尤其在低豐度蛋白標記時優勢顯著。  

2. 穩定性強：凍干粉形態在-20℃避光條件下可保存24個月（開封后建議6個月內用完），溶液狀態（PBS緩沖液，pH7.4）4℃避光可穩定保存3個月，避免傳統PE易氧化失活的問題。  

3. 低內毒素，生物相容性高：生產全程采用無動物源培養基，內毒素含量＜0.1EU/μg（LAL檢測），適用于體內實驗或臨床級檢測試劑開發。  

4. 兼容性強：與主流流式細胞儀（如BD FACSCanto、Beckman CytoFLEX）、熒光顯微鏡（如Leica SP8）及酶標儀（如Tecan Infinite）均匹配，無需額外調整儀器參數。  

?購買疑問&專業解答  

Q1：D5-000是凍干粉還是液體？如何溶解？  

A：提供凍干粉和預溶溶液兩種規格。凍干粉建議用無菌PBS（pH7.4）或廠商推薦的緩沖液溶解，輕柔渦旋至溶解，避免劇烈震蕩導致蛋白變性。  

Q2：流式細胞術中使用D5-000，需要調整激光器功率嗎？  

A：無需額外調整。其最佳激發波長為488nm，主流流式細胞儀的488nm氬離子激光器或固態激光器均可高效激發，建議激光功率設置為100-200mW（具體以儀器說明書為準）。  

Q3：多色實驗中，D5-000適合和哪些染料搭配？  

A：推薦與FITC（激發488nm/發射525nm）、PerCP-Cy5.5（激發488nm/發射670nm）、APC（激發633nm/發射660nm）等染料組合，避免與發射光譜重疊的染料（如Cy5）共用，防止串色。  

Q4：儲存時需要注意什么？  

A：凍干粉需-20℃避光密封保存（可用鋁箔包裹離心管）；溶解后的溶液建議分裝為小份，4℃避光保存，避免反復凍融。  

Q5：是否提供批次間一致性驗證報告？  

A：是的！每批次產品均經過HPLC純度檢測、熒光量子產率測定及功能驗證（如流式細胞術標記效率測試），報告可在下載或聯系客服獲取。  

Q6：能否用于體內成像？  

A：D5-000內毒素極低（＜0.1EU/μg），理論上可用于體內實驗，但建議先通過預實驗驗證其組織分布和代謝特性（不同物種可能存在差異）。  

Q7：如果標記抗體時出現沉淀，怎么辦？  

A：可能是抗體濃度過高或緩沖液pH不適（建議pH6.5-7.5）。可嘗試降低抗體濃度（1-5μg抗體/10μg R-PE），或更換為含0.1% BSA的PBS緩沖液作為反應介質。  

Q8：D5-000的摩爾消光系數是多少？  

A：約1.9×10? M?1cm?1（488nm激發），具體數值以產品說明書為準。  

Q9：是否支持定制化修飾（如偶聯其他分子）？  

A：目前主要提供標準型R-PE，定制化服務需聯系商務團隊評估可行性（如修飾位點是否影響熒光特性）。  

Q10：新手第一次使用，需要注意哪些操作細節？  

A：建議先做小劑量預實驗：取1μg R-PE與1μg抗體混合，4℃避光孵育15分鐘，用流式細胞儀檢測陽性/陰性對照，確認熒光信號強度和背景水平后再批量使用。  

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（注：本文內容基于品牌公開資料及行業常規信息整理，具體以品牌信息文檔為準。）

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