檢測前，將樣品磨碎并加水或提取液提取，溶解獲取蛋白。檢測時，先將樣品墊浸在已提取好的蛋白樣品溶液中，樣品溶液在毛細吸收作用下由樣品墊沿NC膜向吸收墊流動。