Fast Pfu DNA 聚合酶

· 制品內(nèi)容 （250 U）

· 制品說(shuō)明 
Pfu DNA聚合酶為zui常用的高保真DNA聚合酶，在需高保真的PCR反應(yīng)中廣范使用,然而Pfu酶擴(kuò)增靈敏度不高，延伸速度緩慢（0.5kb/分鐘）給眾多的使用者帶來(lái)了不便。針對(duì)普通Pfu酶的以上缺點(diǎn)，SinoBio采用分子進(jìn)化技術(shù)對(duì)普通Pfu酶進(jìn)行改造，制備的新型聚合酶Fast Pfu酶具有快速、高靈敏度、抗干擾能力強(qiáng)等特點(diǎn)，是新一代的高保真DNA聚合酶。使用Fast Pfu能獲得更理想的擴(kuò)增結(jié)果，并大幅度縮短擴(kuò)增反應(yīng)時(shí)間。 

· 用 途 
用于要求保真度比較高的PCR反應(yīng)，包括克隆PCR、DNA片段拼接、引入突變、全基因合成等（參見(jiàn) SinoBio 實(shí)驗(yàn)方案）。 

· 產(chǎn)品特點(diǎn) 
高保真：具有同Pfu酶相同的保真度，為普通Taq酶的10倍。 
快速：Fast Pfu擴(kuò)增速度為普通Pfu酶的數(shù)倍，72℃保溫30秒可延伸1kb以上。 
高效：以λDNA為模板，擴(kuò)增長(zhǎng)度可達(dá)12kb，能高效擴(kuò)增≤6kb片段；對(duì)于人基因組DNA等復(fù)雜模板，能有效擴(kuò)增出3kb特定基因片段。 
*配方的5×Buffer：使PCR擴(kuò)增反應(yīng)更加穩(wěn)定、靈敏、高效。 

· 質(zhì)量保證 
經(jīng)多次柱純化，SDS-PAGE膠檢測(cè)僅可見(jiàn)清晰單一的目的條帶；PCR方法檢測(cè)無(wú)大腸桿菌DNA殘留，無(wú)核酸內(nèi)、外切酶污染。 

· 使用建議

Fast Pfu DNA聚合酶產(chǎn)生的PCR產(chǎn)物為平滑末端，無(wú)3’端"A"突出， 其PCR產(chǎn)物的克隆有兩種方案：
1.PCR前引物進(jìn)行5’端加磷修飾或?qū)CR產(chǎn)物磷酸化處理后再直接克隆于平滑末端的載體中（參見(jiàn) Sinobio 實(shí)驗(yàn)方案）。
2.將產(chǎn)物3’末端加A后再與T-Vector連接（參見(jiàn) SinoBio 實(shí)驗(yàn)方案）。

*由于Fast Pfu DNA聚合酶的校對(duì)活性可引起引物從3′端被部分降解。因此在設(shè)計(jì)引物時(shí)應(yīng)適當(dāng)增加引物的長(zhǎng)度，理想的引物長(zhǎng)度為 20-30堿基。另外為了減少由3′-5′外切酶活性引起的引物降解， 盡量在冰上配置反應(yīng)體系，并zui后加入Fast Pfu酶。。

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· 其他說(shuō)明